在細胞生物學研究、生物制藥等前沿領域,細胞培養(yǎng)基為細胞生長繁衍提供關鍵養(yǎng)分與適宜環(huán)境。掌握其正確使用方法,才能讓細胞蓬勃生長,助力科研突破與產(chǎn)業(yè)革新。
開啟培養(yǎng)前,依據(jù)細胞種類、實驗目的篩選培養(yǎng)基,如貼壁生長的癌細胞系多用含血清、葡萄糖、氨基酸及多種生長因子的RPMI-1640培養(yǎng)基;原代細胞培養(yǎng)常選營養(yǎng)成分豐富、成分貼近體內(nèi)環(huán)境的DMEM培養(yǎng)基,且需添加適量抗生素,像青霉素、鏈霉素,防止微生物“偷襲”,搭建安全“保育箱”。
配制環(huán)節(jié)嚴格按說明書稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于超純水中,用磁力攪拌器均勻混合,避免局部濃度過高“灼傷”細胞。調(diào)節(jié)pH值至7.2-7.4區(qū)間,近似人體生理環(huán)境,可用精密pH計監(jiān)測,配合碳酸氫鈉溶液或鹽酸溶液微調(diào),確保酸堿適度,為細胞營造舒適“棲息地”。
超凈工作臺提前紫外消毒30分鐘,操作者穿戴無菌衣帽、手套,所有器械經(jīng)高溫高壓滅菌。從吸取培養(yǎng)基到接種細胞,動作輕柔連貫,杜絕外界雜菌混入,一旦污染,細胞生長將陷入混亂,實驗前功盡棄。

細胞接種密度也有講究。不同細胞系有各自適配密度,過密易致營養(yǎng)匱乏、空間不足,細胞凋亡;過疏則浪費資源、難以形成生長優(yōu)勢。一般傳代細胞以每平方厘米數(shù)千個細胞為宜,原代細胞稍密。
日常換液與維護不可懈怠。定期吸除舊培養(yǎng)基,補充新鮮“養(yǎng)分”,維持細胞活性,觀察細胞形態(tài)、密度變化,及時傳代或調(diào)整培養(yǎng)條件,依據(jù)細胞狀態(tài)靈活應變,讓這片“生命溫床”持續(xù)孕育希望,為科研產(chǎn)出、藥物研發(fā)源源不斷輸送優(yōu)質(zhì)細胞“原料”。
細胞培養(yǎng)基的使用,從選材配制到無菌操作、接種養(yǎng)護,步步精心。遵循規(guī)范流程,方能解鎖細胞生長密碼,驅(qū)動生命科學車輪滾滾向前。